На этапе очистки и концентрирования необходимо получить раствор нуклеиновой кислоты нужного качества, концентрации и чистоты. Этот этап можно систематизировать следующим образом:

  • Удаление нуклеиновых кислот из раствора:
    • осаждение:
      • высаживание из раствора (этанол, изопропанол, высаливание)
      • соосаждение (ПЭГ, CTAB)
    • сорбция:
      • сорбция на кремниевую поверхность
      • аффинная сорбция (гибридизация, олиго-dT)
      • сорбция на ионнообменные смолы (Chelex)
  • Удаление ингибиторов из раствора:
    • фенол/хлороформенная экстракция
    • флоккуляция
    • диализ

Выбор оптимальной методики подготовки проб заключается в поиске баланса между двумя противоречиями:

  • обеспечение максимальной чистоты, концентрации и качества итогового раствора
  • достижение минимальной стоимости и максимальной производительности анализа

Чем больше информации о составе образца, тем легче выбрать оптимальную методику подготовки проб.

Добавить комментарий


Защитный код
Обновить